黄杉属 Pseudotsuga 现仅存不足 10个种 ^[1-3]，以花旗松 Pseudotsuga menziesii为模式种，依据地理分布可分为美洲组 Americanae group和亚洲组 Asiaticae group，间断分布于东亚和北美西部。黄杉属在中国主要有 5个种，均为特有种 ^[1]，隶属国家Ⅱ级保护濒危树种，主要分布于我国秦岭以南的亚热带山区：湖南、湖北、云南、贵州、安徽、江西、广西、福建和台湾，其中短叶黄杉P. brevifolia为黄杉属在我国分布最南的物种。中国黄杉依据种类的不同，表现出垂直分布特性：东部的华东黄杉 P. gaussenii、台湾黄杉 P. wilsoniana、黄杉 P. sinensis和最西部的澜沧黄杉 P. forrestii^[4]，由于各种原因在不断地减少，甚至灭绝，其中，外生菌根系统的改变是导致濒危树种枯萎、濒临死亡的重要原因之一。

外生菌根（ ECM），作为土壤真菌与宿主植株形成的互惠共生体结构，是树木生存、生长过程中所必须的 ^[5]，真菌从土壤中获得氮源以提供宿主，满足其生长需求。在生态环境中，宿主的一些生理生态变化有时会由与其共生的 ECM真菌所决定。形成 ECM除了菌丝体以外，土壤孢子也是一个重要因素。作为真菌赖以繁殖的孢子库，可以在土壤中保持繁殖能力长达几年，数十年，甚至更长 ^[6]，是陆地生态系统的重要组成部分 ^[7]。土壤孢子，在外界因素：如火灾、飓风、砍伐 ^[8-9]，甚至一些根类分泌的刺激信号 ^[10]（如黄酮类化学物质等）的刺激下，与宿主植株重新形成 ECM。外源树种引种时，与其共生的先锋菌种，往往起着关键作用，它们量大、分布广泛且易与引种树木形成 ECM，可以很好地改善宿主耐性，提高其适应新环境的能力 ^[11-12]。

亲缘关系比较近的树种易形成相似的菌根群落结构，同时华东黄杉种子资源稀缺，基于这两点，在本实验设计中，以黄杉属模式树种花旗松代替华东黄杉进行孢子回接实验，同时对成功形成 ECM结构的真菌进行了鉴定。初步分析花旗松与土壤耐性孢子形成的 ECM群落结构，研究 ECM的形成在宿主生长中所起的作用。这样的研究成果，可以让人更好地了解先锋菌种以及特异性共生真菌在黄杉幼苗定植、生长中表现出来的作用，同时为保护濒危黄杉，防止森林植被的衰退提供一定的理论依据。

华东黄杉是黄杉属在中国的一个特有濒危树种。而 ECM结构体系的缺失可能是导致其枯萎、死亡的重要原因之一。然而，目前尚缺少中国黄杉林区土壤孢子库直接的研究报道，于是，在本实验研究中，利用了三清山黄杉林区采集的土壤，进行耐性孢子回接，以期了解濒危物种林区耐性孢子形成 ECM结构情况，掌握 ECM在宿主定植生长中起到的关键作用。

结果表明，温室环境下，形成 ECM结构的菌种累积曲线在最大土壤样品数处趋于平稳，达到渐近线，甚至有向下的趋势，可见，本孢子回接实验获得的耐性孢子形成的 ECM结构，基本可以反应土壤中所存在能与宿主形成 ECM的耐性孢子群落。从 ECM群落结构可见，少数菌种占有绝对优势，而大多数菌种相对稀少，尤其是先锋菌种（如： Rhizopogon spp.）最易与宿主幼苗形成共生结构，并占有绝对优势。在与黄杉属共生的菌根真菌的研究中，不仅在北美发现了 Pseudotsuga-R. subg. Villosuli^[17-18]这种特异性共生的结构，同时，在亚洲的日本黄杉、中国华东黄杉中，也发现了与其特异性共生的 Rhizopogon菌种 [15, 19-20]。作为黄杉特异性共生的菌种 Rhizopogon spp.，在成熟的黄杉林区相对少见^[15,20]，但在本孢子回接实验中，却是优势菌种（占鉴定序列的 71.8%），可见，此菌种基本是以耐性孢子形式存在于土壤中，等待外部刺激来与宿主形成 ECM^[21-22]。先锋 ECM真菌对宿主根系有较好地响应 ^[23]，易形成 ECM体系，如： Rhizopogon、Laccaria、Hebeloma和 Inocybe等 ^[24]，会以耐性孢子体的形式存在，等待外部的刺激来获得与宿主幼苗形成 ECM^[25-26]的机会。

Rhizopogon spp.在孢子群落中占优势地位，与宿主特异性共生，同时有效地促进宿主植物的生长。可见，在黄杉幼苗定植以及生长中， Rhizopogon spp.似乎是起到关键性作用的 ECM真菌。笔者猜想，每一种濒危树种可能与一些特有的 ECM真菌共生，并依赖于它们生存。尽管如此，仍没有充分的证据表明 Rhizopogon菌种在黄杉林区的丰富度与稳定其生态系统、促进其定植生长之间存在某种特定关系。保护濒危物种，对维持生物多样性极其重要，它们往往建立了一个独特的森林生态系统，并维持着与其相关的物种多样性。

大量研究 [5,27-30]表明，菌根真菌的侵染，可以有效地促进宿主植物的生长。 ECM真菌是很多森林树种赖以定植、生存和生长的必要因素，与宿主之间互利共生： ECM真菌从宿主植物中获得 C源，作为反馈，真菌为宿主提供 N等矿质营养元素 ^[5,29]。Kaewgrajang等 ^[31]的研究发现， ECM真菌的侵染率和龙脑香幼苗的生物量（干重）成显著正相关。基于现有的研究结果同样显示， ECM真菌的侵染率、种类以及菌种数量，均对宿主植物花旗松幼苗的生长产生影响（参见结果部分）。显然，为了更好地了解 ECM体系在生理学以及生态学方面可能表现出来的作用，就有必要深入探究 ECM群落对宿主生长的作用机制。

ECM真菌群落结构很大程度上受到一些特定生物因素的影响，如：菌种本身的分布，孢子密度等 ^[32]。此外，一些非生物因素，如土壤（土壤理化性质等）等也影响 ^[33]，或者说控制着某一地区的真菌群落 ^[34]。本研究 RDA分析结果显示： OM、K、Cond以及 pH值对 ECM群落结构的形成存在显著影响。但 Axis1和 2的因素解释量仅 35.3%（分别为 19.3%和 16.0%，图5），可见还有其它一些未被测定的土壤理化性质，如：重金属 [35-36 ]等，土壤的质地 ^[37]或其他非可控因素对 ECM群落结构的形成同样起着重要作用。其次，一些生物因素，比如，群体之间的相互作用：真菌之间^[38]、真菌与其他微生物之间 ^[39]、植物之间 ^[40]等，同样影响着耐性孢子形成的 ECM群落结构。

由于 ECM群落结构特性，可以被用来作为城市环境中植物的健康状况评估的指标。因此，在后续的研究工作中，有必要加深土壤理化性质、生物等环境因素共同作用对 ECM群落结构影响机制的深入探讨，这对掌握林区 ECM群落以及 ECM在生态系统中表现出来的作用至关重要，是保护菌根生态系统的重要环节。同时，加强微生物技术的利用，筛选出有利菌种资源（细菌 ^[41]、丛枝 ^[28-29]与外生菌根真菌 [5,15,31]），人为地控制某些可控因素，为菌根化提供更好的生存环境，可以更好地应用于濒危树种的保护与林业重建，改善生态环境。