于 2010年 6月末至 7月末光肩星天牛交尾产卵时，在哈尔滨香坊区远大生态公园林缘带和哈平路绿化带上，选择 3～ 10 cm糖槭枝条进行套笼接虫，并采集 3～ 5 cm糖槭枝条进行室内套笼实验，每个套笼接雌雄成虫各 1头。由于光肩星天牛雌成虫多在下午和傍晚产卵，故于每天下午 4点接虫，接虫后第二天凌晨7点将虫取回室内饲养，第 2 d再野外接虫进行人工模拟刻槽、产卵刻槽实验。光肩星天牛产卵期在哈尔滨主要在 7月期间，卵的发育历期 10 d左右，按刻槽内卵日龄不同，分别采集 0～ 9 d的 10组刻槽微生境的样本，以无刻槽处为对照。

用尖刀挖取刻槽下及周围 1 cm处（刻槽微生境），分别称取人工模拟刻槽、有效刻槽 (光肩星天牛雌成虫产卵刻槽分有效刻槽和空槽，有效刻槽即成功产卵并封槽的刻槽。)微生境的样本及相同大小对照处鲜重后，置入烘箱 80℃下烘干至恒重，测量干重。取每日龄人工模拟刻槽、有效刻槽微生境及对照各 10个，按下列公式计算其含水量：

H=（X－G）/ X×100% (1)

式 (1)中： H、X、G分别代表刻槽微生境含水量、刻槽鲜重及刻槽干重。

用尖刀挖取人工模拟刻槽、有效刻槽槽下及周围 1 cm处及相同大小对照，烘干，依次放入锥形瓶，分别加入 25 mL去离子水。28℃ 150 r•min^-1振荡培养 48 h后，取每日龄的人工模拟刻槽、有效刻槽处微生境的样本及对照各 10个，测其平 pH值。

在无菌条件下，用尖刀挖取同日人工模拟刻槽、有效刻槽槽下及周围 1 cm处及大小相同的对照各 10个。用去离子水冲洗 3次，切成直径 0.5 mm左右小粒，置入锥形瓶分别加入 50 mL去离子水。 28℃ 150 r•min^-1振荡培养 0.5 h后，将菌液分别稀释至 10^-5、10^-6、10^-7倍。置入灭菌均质器中 8 000 r•min^-1 1 min后，各提取 0.1 mL涂布接菌到牛肉膏蛋白胨和马铃薯培养基上，置入人工培养箱，分别于 37℃下 2 d和 38℃下 4 d观察并统计微生物数量（主要统计真菌和细菌数量）。

林木树干或枝条的含水量主要随环境因素的变化而变化，但同一树干或枝条含水量的变化基本是一致的。同一枝条上采集的人工模拟刻槽、有效刻槽及对照含水量随光肩星天牛卵发育日期的变化（如图1）。可以看出， 0～ 7日龄期间有效刻槽含水量高于对照和人工模拟刻槽含水量，呈逐渐向对照含水量接近并趋向平稳， 8～ 9日龄期间基本接近对照含水量。在 0～ 9日龄期间对照含水量比较平稳。人工模拟刻槽含水量 0日龄时与对照含水量接近，后逐渐呈下降趋势至 7日龄时，趋向平稳，在 8～ 9日龄期间呈平稳趋势。对所得 0～ 9日龄人工模拟刻槽、有效刻槽及对照含水量进行对比分析（如表1）。说明光肩星天牛产卵分泌物对刻槽微生境含水量影响比较显著，但随时间的增加，与对照含水量逐渐接近。

图1 人工模拟刻槽、有效刻槽及对照含水量的日变化
Fig.1 The daily variations of water contents of artificial simulationof groove, effective gnawing nidus and control

表1 不同日龄人工模拟刻槽、有效刻槽及对照含水量比较 †
Table 1 The comparison on water contents of different day-age artificial simulation of gnawing nidus, effective gnawing nidus and control

人工模拟刻槽、有效刻槽及对照的 pH值随光肩星天牛卵日龄的变化（如图2），可以看出：有效刻槽微生境 pH值均高于人工模拟刻槽微生境及对照 pH值，其原因是光肩星天牛雌成虫产卵分泌物具有弱碱性，pH值为 8～ 9^[7]。同时有效刻槽微生境 pH值在 0～ 9日龄期间呈缓慢上升，这可能跟含水量在 0～ 9日龄期间的逐渐减少有关。人工模拟刻槽微生境 pH值基本呈平稳状态略高于对照，在 0、2、4、8、9日龄期间分别呈接近或相近。对照 pH值在 0～ 9日龄期间呈平稳状态。对不同日龄光肩星天牛人工模拟刻槽、有效刻槽及对照 pH值进行对比分析（如表2），表明光肩星天牛产卵分泌物对刻槽微生境 pH值的影响比较显著。

图2 人工模拟刻槽、有效刻槽及对照 pH值的日变化
Fig.2 The daily variations of pH of artificial simulation of gnawing nidus, effective gnawing nidus and control

寄主植物表皮微生物数量的变化与所处环境密切相关，如寄主植物所在立地条件、光照、温湿度以及其它在寄主植物上活动的生物等。选择野外接虫实验的立地条件相同，但不同光肩星天牛卵日龄下采集的刻槽微生境样本受不同光照、温湿度以及其它生物活动的影响，对照微生物数量波动比较大。人工模拟刻槽、有效刻槽微生境及对照微生物数量日变化，如图3所示，其中 Z1、Z2、Z3和 X1、X2、X3分别代表有效刻槽、人工模拟刻槽和对照真菌数量及细菌数量。从图3可以看出， 0～ 4日龄期间有效刻槽微生境真菌数量低于对照， 4日龄后逐渐与对照真菌数量接近， 5～ 9日龄期间两者基本一致。而人工模拟刻槽微生境与对照真菌数量在 0日龄期间基本一致，随后呈略高于对照真菌数量。有效刻槽微生境细菌数量在 0～ 5日龄期间低于对照和人工模拟刻槽， 5～ 6、6～ 9日龄期间分别呈和对照细菌数量接近和基本一致。而人工模拟刻槽微生境在 0～ 2日龄期间与对照细菌数量基本一致， 2日龄后至 9日龄期间细菌数量高于对照。不同光肩星天牛卵日龄下对同一树枝上人工模拟刻槽、有效刻槽及对照微生物数量进行统计，结果如表3。经过对比分析，光肩星天牛产卵分泌物对刻槽微生境微生物数量影响比较显著，产卵分泌物对刻槽微生境微生物在 0～ 5日龄期间有抑制作用。

表2 不同日龄光肩星天牛人工模拟刻槽、有效刻槽及对照 pH值比较
Table 2 The comparison on pH of different day-age artificial simulation of gnawing nidus, effective gnawing nidus and control

图3 人工模拟刻槽、有效刻槽及对照微生物数量日变化
Fig.3 The daily variations of microorganisms number of artificial simulation of gnawing nidus, effective gnawing nidus and control

表3 不同日龄人工模拟刻槽、有效刻槽及对照微生物数量对比
Table 3 The comparison on microorganisms number of different day age artificial simulation of gnawing nidus, effective gnawing nidus and control